PartySmart的药效学和毒理学特征,用于Wistar大鼠酒精宿醉的草药制剂 2017-02-01 12:09:52

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所属分类 :股票

作者:Venkataranganna,M V Gopumadhavan,S; Sundaram,R;同伴,Ghouse; Mitra,SK背景和目标:PartySmart是一种草药制剂,用于管理酒精宿醉和临床情况下的其他相关毒性效应本研究旨在研究PartySmart(大鼠草药制剂)的药效学和口服毒性

方法:效果在大鼠中以125,250和500 mg / kg bwt的剂量评估PartySmart对血液乙醛和酒精含量的影响用PartySmart以2000 mg / kg bwt的极限测试剂量进行急性毒性研究,po在重复剂量90天研究中在整个研究期间,PartySmart以500和1000 mg / kg bwt的剂量一天一次口服给药,结果:与对照PartySmart相比,PartySmart剂量依赖性地降低血液乙醇和乙醛水平,剂量为500 mg / kg bwt显着降低乙醇和乙醛水平的曲线下面积(AUC)它增加了500 mg / kg bwt的肝醇脱氢酶(ADH)和醛脱氢酶(ALD) H)剂量为250和500 mg / kg体重的活动显着急性毒性研究显示没有临床症状和前期死亡事件发现PartySmart的LD ^ sub 50 ^大于2000 mg / kg bwt PartySmart没有显着差异在重复剂量研究中,与对照组相比,观察治疗组的体重,食物摄入,血液学和临床化学以及器官重量比

所有靶器官的组织病理学检查均未显示药物毒性引起的病变证据解释和结论: PartySmart通过增加ADH和ALDH活性来增强乙醛代谢而没有任何副作用这些发现表明PartySmart可以在没有任何毒性的酒精宿醉管理中发挥有益作用关键词乙醛 - ADH - 酒精 - ALDH - PartySmart - 毒性酒精宿醉是常见的导致受影响个人严重受损的情况1宿醉的特点是重度饮酒后出现令人不快的身心症状的星座酒精通过乙醇脱氢酶(ADH)代谢成中间产物乙醛,然后通过第二种醛醛脱氢酶(ALDH)将乙醛转化为乙酸乙酯

高浓度的乙醛会产生毒性作用,例如快速脉搏,出汗,皮肤潮红,恶心和呕吐

在大多数人中,ALDH快速有效地代谢乙醛,因此这种中间代谢物不会在高浓度下积累

乙醛的累积导致宿醉的身体症状的发展,包括疲劳,头痛,对光和声的敏感性增加,眼睛发红,肌肉酸痛和口渴3许多治疗被描述为预防宿醉,缩短其持续时间,并减轻其症状的严重程度,包括无数的民间疗法和建议PartySmart是一种这样的草药制剂已知在预防酒精引起的宿醉方面具有有益作用的口粮以前的研究表明,酒精摄入前使用PartySmart进行治疗可以快速消除酒精和乙醛4-6 PartySmart是一种含有凤凰,菊苣提取物,穿心莲的提取物的聚醚配方葡萄(Vitis vinifera),余甘子(Phyllanthus amarus)和余甘子(Emblica officinalis)已知这些植物含有多种抗氧化剂,研究显示,超氧化物和羟基自由基的剂量依赖性抑制,Fe ^ sup 2 + / /抗坏血酸系统诱导的脂质过氧化和蛋白质氧化7-用这些植物进行的早期研究表明,它们可有效改善乙醇引起的胃溃疡和组胺和胃泌素浓度的升高12-15早期研究了该制剂的许多单个成分对不同模型实验性肝脏的保护作用

totoxicity16所有这些成分对多种肝毒性药物如乙醇,CCl ^ sub 4 ^,抗结核药物,硫代乙酰胺,etcl2,17,20Oligomeric proanthocyanidins,Vitis vinifera的活性成分,已具有保护作用,已知调节乙醇代谢和预防毒性作用21 因此,我们进行了这项研究,以评估PartySmart在大鼠中口服给药的药效学和毒理学特征

材料和方法动物:实验室培育的任何性别的Wistar大鼠都用于实验

将动物饲养并适应22 + -3的恒定温度

[℃] C,相对湿度50-70%,并暴露于12小时昼夜循环颗粒大鼠饲料(M / s Amrut饲料,Pranav Agro Industries Ltd,Sangli,印度)和水(通过活性炭过滤器)在随后提供由Eureka Forbes Ltd,Mumbai,India制造的Aquaguard在线水过滤器和净化器上暴露于紫外线中

研究方案经机构动物伦理委员会(IAEC)批准,用于该研究的动物为按照环境和动物部动物实验室控制和监督委员会(CPCSEA)建议的指导方针进行维护est(动物福利部),印度政府化学品:由德国Rankem实验室制造的所有分析级化学品用于研究PartySmart的制备:PartySmart包含Phoenix dactylifera的干燥水提取物(水果:188毫克),菊苣(Cichorium intybus)(种子:188毫克),穿心莲(地上部分:188毫克),葡萄(水果:188毫克),叶下珠(地上部分:124毫克)和余甘子(果实:124毫克)植物材料的成分是从印度泰米尔纳德邦Tuticorin的M / s Abhirami植物公司采购,并由R Kannan博士,植物学家,研发中心,喜马拉雅药物公司,班加罗尔和代金券标本保存在研发中心这样的两批或多批制剂来自通过指纹分析对不同来源的原料进行标准化,使用高效薄层色谱(HPTLC)进行表征1克PartySmart通过在水中回流提取用15ml二氯甲烷浴萃取过滤并浓缩至2ml;将10μl浓缩物点在预涂硅胶板上用二氯甲烷:甲醇(97:3)显色板

使用密度计在254nm处扫描显影板.HardSmart的HPTLC指纹图示于图中血液乙醇和乙醛中水平:将32只体重在250-275g之间的雄性大鼠分成4组,每组8只

第1组大鼠接受10ml / kg bwt载体(水)作为对照组2,3和4组大鼠接受PartySmart治疗剂量为125,250和500毫克/千克体重(bwt),po,分别为水悬浮液

各处理后1小时,所有动物均以5 ml / kg bwt的剂量接受酒精

钡后给药后1小时,1小时,2小时和4小时的眶后丛进入肝素化管并立即储存于28℃进行进一步分析评估酒精和乙醛水平:加入约05毫升全血1毫升001%isop顶空玻璃小瓶中的丙醇(10%高氯酸)和混合孔然后将小瓶置于顶空分析仪22,23中使用Shimadzu气相色谱仪模型GC 14B(日本)估算血液中的乙醇和乙醛水平

Porapak Q,2米x 1/8英寸色谱柱,以氮气为载气,流速为每分钟30毫升

烘箱,进样器和检测器的温度条件分别为160,220和250℃顶空分析仪(HSA) -1 Mayura Analytical Pvt Ltd,印度班加罗尔)温度为90℃,平衡时间为30分钟,运行时间为10分钟通过顶空分析仪将约1ml蒸汽自动注入色谱柱,记录色谱图使用数据站(Class-GCIO)肝脏乙醇脱氢酶和乙醛脱氢酶活性:将24只体重在250-275g之间的雄性大鼠分成3组,每组8只,每组1只大鼠接受10ml / kg bwt的载体(水)并用作对照组2和3的大鼠分别以250和500mg / kg bwt,po的剂量接受PartySmart作为水悬浮液在各处理后1小时,用麻醉剂处理所有动物并且肝脏是切除并用于估计ADH和ALDH在磷酸盐缓冲液中制备肝匀浆(10%浓度)(0通过离心(Remi Instruments,Mumbai)分别在2000和10000g下制备1 M)和线粒体和胞质组分

使用Keung24的方法测定醇脱氢酶活性

使用Lindahl和Evces25的方法估计醛脱氢酶活性

比活性为表示为mU / mg蛋白质通过Lo wry等人的方法测量蛋白质

急性毒性:在该研究中使用重量在170-200g和约1520个月之间的Wistar菌株的实验室繁殖大鼠

使它们适应环境

标准实验室饮食和22±3℃的恒定室温在禁食过夜后,称重动物并使用胃插管以管饲法单剂量施用PartySmart.SandSmart粉末以剂量的口服水性悬浮液形式施用2000mg / kg bwt27剂量2000mg / kg的极限试验,bwt用6只雌性大鼠(每步3只动物)进行

第一组雌性大鼠以2000 mg / kg bwt的剂量开始治疗没有毒性体征和前期死亡根据固定的时间间隔(24小时后)结果,另外3只动物接受试验治疗剂量为2000mg / kg bwt的物质在第15天,对所有动物进行大体尸检和病理观察,如果有的话,重复剂量90天口服毒性28:Wistar品系的近交雄性和雌性大鼠,体重在180-210g之间

在本研究中使用大约8周龄,并且在研究开始之前允许其适应标准实验室条件一周的时间

将动物保持在温度为22℃的空调房间中 - 3℃和50-70%相对湿度,12小时光照和黑暗循环给大鼠喂食商业颗粒饮食并自由饮水60只大鼠被分成3组,每组20只,每只大鼠,随机分配等同l每组中的雄性和雌性数目第1组接受10 ml / kg bwt的载体(水,po)并作为对照组第2组和第3组接受PartySmart治疗,剂量分别为500和1000 mg / kg bwt,po 90天药物以水悬浮液形式给药所有实验动物每天观察一般症状和毒性症状所有动物的体重和食物摄入量在研究开始前记录,之后每周一次在整个研究期间,在尸检前从眼眶后丛收集血样用于评估血液学参数[Hb,压积细胞体积(PCV),红细胞计数,白细胞计数和白细胞计数差异]血清进行评估临床化学参数[肝功能检查:天冬氨酸转氨酶(AST),丙氨酸转氨酶(ALT),碱性磷酸酶(ALP),总蛋白和白蛋白;肾功能检查:血尿素氮和肌酐;脂质谱:胆固醇和甘油三酯,以及其他参数:空腹血糖和氯化物]使用自动分析仪试剂盒(Diagnostic System,GmbH,德国)在第91天,所有动物在使用麻醉剂过夜快速处死后靶器官如肝脏收集肾脏,肾脏,肾上腺,脾脏,心脏,脑,垂体,睾丸/卵巢和子宫并称重其他器官如胃,胸腺,淋巴结,食道,附睾,前列腺,甲状腺,甲状旁腺,股骨和皮肤也是收集所有器官用10%中性缓冲福尔马林固定组织进行处理,切片并用苏木精和曙红(H&E)染色进行常规组织病理学检查统计分析:表示为平均值±SEM,并使用Oneway ANOVA进行统计学分析通过Dunnet的多重比较测试,使用GraphPad Prism软件包(版本401,GraphPad Software,Inc USA)来找出显着性水平P Resu酒精和乙醛的动力学特征:与对照相比,使用PartySmart预处理在不同时间点以剂量依赖性方式降低血液酒精水平尽管在不同时间间隔观察到血液酒精浓度水平下降的趋势,但发现无效但与对照相比,较高剂量的曲线下面积(AUC)显着下降

酒精的总AUC为17509±3对照组06和PartySmart治疗组16816 + - 719,16051 + - 521和15026 + - 867,剂量分别为125,250和500 mg / kg bwt,酒精AUC显着降低(P PartySmart治疗导致剂量依赖性血液乙醛水平降低,但在剂量为250和500 mg / kg bwt时,500 mg / kg剂量PartySmart治疗显着降低,显着降低乙醛水平的AUC(18304 + - 647和17474 + - 886)与对照(20395±443)相比(表I)肝脏ADH和ALDH活性:与对照相比,仅在500mg / kg bwt剂量下总肝脏ADH活性显着增加,并且在对照之间未观察到显着差异和PartySmart治疗(250 mg / kg bwt)虽然在酶活性中观察到增加的趋势但与对照相比,在剂量水平为250和500 mg / kg bwt的PartySmart给药后,肝脏ALDH活性显着增加(表I) )急性毒性:在极限测试剂量为2000 mg / kg bwt的PartySmart治疗后没有观察到死亡率没有毒性体征和前期死亡没有观察到任何大鼠的严重病理结果没有可观察到的严重异常可以归因于尸检时的药物毒性极限测试在总共6只动物中以2000 mg / kg bwt的剂量进行测试后,通过口服途径发现LD50大于2000 mg / kg bwt重复剂量90天口服毒性:没有观察到临床症状和终末期死亡在PartySmart治疗组中,雄性和雌性大鼠的体重与对照组相当没有观察到食物摄入的变化血液学和生化参数在正常范围内在所有药物治疗组中的范围(表II和III)在任何治疗组中均未发现与药物毒性有关的严重异常在o中没有显着差异与对照组相比,治疗组中动物的体重分布(表IV)所有靶器官的组织病理学检查均未显示药物毒性引起的病变的证据根据重复剂量90天口服毒性的结果,未观察到不良反应PartySmart的水平(NOAEL)是1000 mg / kg bwt讨论酒精引起的宿醉的症状归因于几个原因主要的归因因素包括酒精的直接生理效应和酒精代谢产生的化合物的生理效应众所周知,酒精代谢的中间代谢产物乙醛的积累在宿醉的发展中起关键作用在本研究中,我们发现PartySmart与对照相比显着降低了血液乙醇和乙醛水平

观察到的效果更为突出关于乙醛消除而不是酒精elimi这种效应可能是由于ADH酶对酒精代谢的增加,其在肝脏中以最高浓度存在,酒精不会经历肝脏代谢,进入体循环和“血液酒精循环”醛脱氢酶,负责乙醛代谢的酶是NAD ^ sup + ^依赖性酶,被认为是肝脏中乙醛氧化的主要途径24,29在我们的研究中,我们使用乙醛作为底物来估计NAD ^ sup + ^依赖性ALDH在肝脏线粒体和胞质溶胶中已知大鼠肝脏含有其他酶系统,它们也能够氧化乙醛,并且由于它们对底物的亲和力低而导致肝脏线粒体中的乙醛氧化

用PartySmart研究显示了显着的剂量肝脏ADH和ALDH活性的依赖性增加PartySmart c增加血液乙醇和乙醛的清除率应该通过增强ADH和ALDH活性来增加新陈代谢这些观察结果清楚地表明,PartySmart加速了乙醇和乙醛的代谢,从而缓解了酒精摄入后的毒性作用使用PartySmart的急性口服毒性显示LD ^ sub 50 ^大于2000毫克/千克bwt 使用PartySmart重复剂量90天口服毒性显示对所评估的参数没有不利影响,从而表明PartySmart对所用剂量没有不良影响

总之,PartySmart通过增加肝脏ADH和ALDH的水平来增强乙醇和乙醛代谢

在酒精中毒的动物中也被发现是安全的并且没有毒性研究所揭示的副作用这些发现将有益于未来的酒精宿醉管理研究利益冲突作者特此声明没有利益冲突参考文献1 Marks V酒精的临床病理学J Clin Pathol 1983; 36:365-78 2 Wiese J,McPherson S,Odden MC,Shlipak MG Opuntia ficus indica对酒精宿醉症状的影响Arch Intern Med 2004; 164:1334-40 3 Swift R,Davidson D酒精宿醉:机制和调解员酒精健康Res World 1998; 22:54-60 4 Wiese JG,Shlipak MG,Browner WS酒精宿醉Ann Intern Med 2000; 132:897-902 5 Prabhakar B,Venkataramanappa PV研究PartySharp预防宿醉和消除乙醛防腐剂2001; 98:206-9 6 Prabhakar B,Kolhapure SA评估“PartySmart”在预防酒精引起的宿醉方面的功效和安全性Med Update 2004; 11:55-60 7 Trivedi NP,Rawal UM穿心莲中的穿心莲(Ner)的肝脏保护和抗氧化特性在小鼠体内诱导肝脏损伤印度J Exp Biol 2001; 39:41-6 8 Papetti A,Daglia M,Gazzani G水葫芦中的水溶性化合物的抗氧化和抗氧化活性(Treviso red chicory)J Pharm Biomed Anal 2002; 30:939-45 9 Kamdem RE,Sang S,Ho CT新型穿心莲内酯的超氧化物清除活性的机制 - 来自穿心莲的天然产物Nees J Agri Food Chem 2002; 50:4662-5 10 Lu Y,Zhao WZ,Chang Z,Chen WX,Li L来自葡萄籽的Procyanidins可防止佛波醇酯诱导的氧化细胞和遗传毒性损伤Acta Pharmacol Sin 2004; 25:1083-9 11 Hong YJ,Tomas-Barberan FA,Kader AA,Mitchell AE Deglet Noor Dates(Phoenix dactylifera)的黄酮苷和原花青素组成J Agri Food Chem 2006; 54:2405-11 12 Pramy othin P,Samosorn P,Poungshompoo S,Chaichantipyuth C余甘子(Phyllanthus emblica Linn)对乙醇诱导的大鼠肝损伤的保护作用J Ethnopharmacol 2006; 707:361-4 13 Al-Rehaily AJ,Al-Howiriny TA,Al-Sohaibani MO,RafatuUah S'Amla'Emblica officinalis对大鼠体内试验模型的胃保护作用Phytomedicine 2002; 9:515-22 14 Raphael KR,Kuttan R Phyllanthus amarus extract对实验性胃病变和炎症的抑制作用J Ethnopharmacol 2003; 87:193-7 15 Al-Qarawi AA,Abdel-Rahman H,Ali BH,Mousa HM,ElMougy SA日期(Phoenix dactylifera L)对大鼠乙醇诱导的胃溃疡的改善作用J Ethnopharmacol 2005; 98:313-7 16 Sultana S,Ahmed S,Sharma S,Jahangir T Emblica officinalis逆转硫代乙酰胺诱导的氧化应激和原发性肝癌的早期促进事件J Pharm Pharmacol 2004; 56:1573-9 17 Visen PK,Shukla B,Patnaik GK,Dhawan BN穿心莲内酯保护大鼠肝细胞免受扑热息痛诱导的损伤J Ethnopharmacol 1993; 40:131-6 18 Sultana S,Ahmad S,Khan N,Jahangir T Emblica officinalis(Gaertn)对Wistar大鼠CCl ^ sub 4 ^诱导的肝毒性和DNA合成的影响Indian J Exp Biol 2005; 43:430-6 19 Tasduq SA,Kaisar P,Gupta DK,Kapahi BK,Maheshwari HS,Jyotsna S,et al 50%的余甘子水醇提取物对抗结核药物引起的肝毒性的保护作用Phytother Res 2005 ; 19:193-7 20 Ahmed B,Al-Howiriny TA,Siddiqui AB Cichorium intybus种子的抗肝毒活性J Ethnopharmacol 2003; 87:337-40 21 Kushnerova NF,Sprygin VG,Rakhmanin,IuA调节体内乙醇代谢与低聚原花青素作为预防措施对抗其毒性作用Gig Sanit 2003; 5:58-61 22 Mendenhall CL,McGeen J,Green ES使用顶空气相色谱法同时定量生物材料中乙醇和乙醛的简单,快速和灵敏的方法J Chromatogr 1983; 790:725-36 23 Steenaart NA,Clarke DW,Brien JF 血液中乙醇和乙醛的气液色谱分析,最小的人工乙醛形成J Pharmacol Methods 1985; 14:199-212 24 Keung WM生物化学研究的一种新的酒精脱氢酶抑制剂来自葛根酒精Clin Exp Res 1993; 17:1254-60 25 Lindahl R,Evces S比较大鼠,小鼠和兔肝中醛脱氢酶的亚细胞分布Biochem Pharmacol 1984; 33:3383-9 26 Lowry OH,Rosebrough NJ,Farr AL,Randall RJ通过叶酚试剂测定蛋白质J Biol Chem 1951;经济合作与发“啮齿类动物口服毒性研究”,指南No 408,OECD出版社,法国,1998 p 1-10 29 Hasumura Y,Teschke R,Lieber CS大鼠肝线粒体中乙醛氧化的特征J Biol Chem 1976; 257:4908-13 MV Venkataranganna,S Gopumadhavan,R Sundaram,Ghouse Peer&SK Mitra研发中心,喜马拉雅药物公司,印度班加罗尔于2007年3月6日收到转载请求:喜马拉雅研发中心执行董事SK Mitra博士Drug Company Makali,Bangalore 562 123,India电子邮件:[email protected]版权所有印度医学研究委员会2008年5月(c)2008印度医学研究期刊由ProQuest LLC提供保留所有权利